347 سٹینلیس سٹیل کیمیکل کمپوزیشن وینس یا کیپلیری خون کی شدت، جو SARS-CoV-2 کے لیے مخصوص ہے، T-cell کے ردعمل COVID-19 کے خلاف قوت مدافعت کا تعین کرتے ہیں۔

Nature.com پر جانے کا شکریہ۔آپ محدود سی ایس ایس سپورٹ کے ساتھ براؤزر کا ورژن استعمال کر رہے ہیں۔بہترین تجربے کے لیے، ہم تجویز کرتے ہیں کہ آپ ایک اپ ڈیٹ شدہ براؤزر استعمال کریں (یا انٹرنیٹ ایکسپلورر میں مطابقت موڈ کو غیر فعال کریں)۔اس کے علاوہ، جاری تعاون کو یقینی بنانے کے لیے، ہم سائٹ کو بغیر اسٹائل اور جاوا اسکرپٹ کے دکھاتے ہیں۔
سلائیڈرز فی سلائیڈ تین مضامین دکھا رہے ہیں۔سلائیڈوں کے ذریعے جانے کے لیے پیچھے اور اگلے بٹنوں کا استعمال کریں، یا ہر سلائیڈ سے گزرنے کے لیے آخر میں سلائیڈ کنٹرولر بٹن استعمال کریں۔

347 سٹینلیس سٹیل کیمیکل کمپوزیشن

سٹینلیس سٹیل 347 کوائل ٹیوب کیمیکل کمپوزیشن

سٹینلیس سٹیل 347 کوائل ٹیوب کی کیمیائی ساخت اور مکینیکل خصوصیات درج ذیل ہیں:
- کاربن - 0.030% زیادہ سے زیادہ
- کرومیم - 17-19%
- نکل - 8-10.5%
- مینگنیج - 1% زیادہ سے زیادہ

سٹینلیس سٹیل 347 کوائل ٹیوب مکینیکل پراپرٹیز

سٹینلیس سٹیل 347 کوائل ٹیوب بنانے والے کے مطابق، 347 کوائل ٹیوب کی مکینیکل خصوصیات:
- تناؤ کی طاقت (psi) - 75,000 منٹ
- پیداوار کی طاقت (psi) - 30,000 منٹ
- لمبا (2 انچ میں %) - 25% منٹ
برنیل سختی (BHN) - 170 زیادہ سے زیادہ

سٹینلیس سٹیل 347 کوائل ٹیوب کی درخواستیں اور استعمال

• سٹینلیس سٹیل 347 کوائل ٹیوب شوگر ملز میں استعمال ہوتی ہے۔
• سٹینلیس سٹیل 347 کوائل ٹیوب کھاد میں استعمال ہوتی ہے۔
• صنعت میں استعمال ہونے والی سٹینلیس سٹیل 347 کوائل ٹیوب۔
• سٹینلیس سٹیل 347 کوائل ٹیوب پاور پلانٹس میں استعمال ہوتی ہے۔
• سٹینلیس سٹیل 347 کوائل ٹیوب خوراک اور ڈیری میں استعمال ہوتی ہے۔
• سٹینلیس سٹیل 347 کوائل ٹیوب آئل اینڈ گیس پلانٹ میں استعمال ہوتی ہے۔
• سٹینلیس سٹیل 347 کوائل ٹیوب بنانے والا جو جہاز سازی کی صنعت میں استعمال ہوتا ہے۔

خیال کیا جاتا ہے کہ SARS-CoV-2 کے مخصوص T خلیات کووڈ-19 کے انفیکشن اور بڑھنے سے بچاتے ہیں، لیکن اس کا کوئی براہ راست ثبوت نہیں ہے۔یہاں، ہم نے لیان کے خون کے جمع ہونے کے 6 ماہ کے اندر SARS-CoV-2-مخصوص انٹرفیرون-γ مثبت T خلیوں کے خون کی پوری پیمائش کا موازنہ مثبت COVID-19 تشخیصی ٹیسٹ کے نتائج (PCR اور/یا پس منظر کے بہاؤ) سے کیا۔148 شرکاء میں جنہوں نے وینس خون کے نمونے عطیہ کیے، SARS-CoV-2 کے مخصوص T سیل ردعمل کی شدت ان لوگوں کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھی جو محفوظ رہے ان لوگوں کے مقابلے میں جو متاثر ہوئے تھے (P <0.0001)۔انفیکشن کا خطرہ %، جبکہ زیادہ شدت نے اس خطرے کو 5.4 فیصد تک کم کر دیا۔یہ نتائج ایک اضافی 299 شرکاء کے لیے عام کیے گئے جنہوں نے ایک قابل توسیع کیپلیری بلڈ پرکھ کا تجربہ کیا جو آبادی کے پیمانے پر ٹی سیل مدافعتی ڈیٹا (14.9% بمقابلہ 4.4%) تک رسائی کو آسان بنا سکتا ہے۔اس طرح، SARS-CoV-2 کے لیے مخصوص T خلیات کی پیمائش انفیکشن کے خطرے کی پیش گوئی کر سکتی ہے اور انفرادی اور آبادی کی مدافعتی حیثیت کی نگرانی کرتے وقت اس کا اندازہ کیا جانا چاہیے۔
SARS-CoV-2 انفیکشن کے خلاف مدافعتی ردعمل کی پیمائش اور سمجھنا مستقبل کی موثر حکمت عملی تیار کرنے کے لیے اہم ہے تاکہ مستقبل میں COVID-19 پھیلنے کے عوامی صحت اور معاشی اثرات کو کم کیا جا سکے۔مدافعتی ارتباط کی شناخت وائرل انفیکشن کے لئے آبادی کے حساسیت کے بارے میں اہم معلومات فراہم کرے گی، ممکنہ طور پر چوٹی کے ہسپتال میں داخل ہونے کی ابتدائی انتباہ، اور لوگوں کو ذاتی طور پر ان کے انفیکشن کے خطرے اور دوسروں کو متاثر کرنے کے خطرے کا انتظام کرنے کی بھی اجازت دے گی۔مدافعتی نگرانی صحت مند اور زیادہ خطرہ والے مریضوں میں COVID-19 ویکسین کی تاثیر کا جائزہ لینے کے لیے اہم ثابت ہوئی ہے 1,2,3 خاص طور پر SARS-CoV-24 اتپریورتیوں میں، اور امیونوکمپرومائزڈ کا پتہ لگانے کا مطلب یہ ہوگا کہ قوت مدافعت کو فروغ دینے کی ضرورت ہے اور اس سے بچاؤ مستقبل کے پھیلنے
SARS-CoV-2 انفیکشن کے خلاف کسی فرد کی قوت مدافعت کی سطح متعدد عوامل پر منحصر ہے: نمائش کے وقت وائرل لوڈ، وائرس کی مختلف حالتیں، عمر، ویکسینیشن/انفیکشن کی سابقہ ​​حالت، کموربیڈیٹیز، ادویات، اور سب سے اہم بات، اینٹی SARS-CoV انفیکشن۔ .2 انکولی مدافعتی ردعمل وائرس کے سامنے آنے کے وقت ہوتا ہے5۔SARS-CoV-2 انفیکشن اور/یا ویکسینیشن کے خلاف مدافعتی ردعمل کی تشخیص نے سیرولوجیکل اسیسز پر توجہ مرکوز کی ہے جو ساختی پروٹین (مثلاً اسپائک گلائکوپروٹین) کے لیے مخصوص اینٹی باڈیز کی موجودگی کی پیمائش کرتے ہیں۔تاہم، اکیلے اینٹی باڈیز کی موجودگی یا عدم موجودگی حفاظتی مدافعتی ردعمل کا درست تعین نہیں کرتی، کیونکہ ردعمل وقت کے ساتھ نمایاں طور پر کم ہوتے ہیں اور SARS-CoV-2 کی مختلف حالتوں کو صحت یاب ہونے یا دوہری ٹیکے لگوانے والے افراد میں کمزور سرگرمی کا باعث بن سکتے ہیں، کامیابی کے انفیکشن کی تعداد 7۔درحقیقت، Omicron ویرینٹ (B.1.1.529) کی وجہ سے ہونے والی علامتی COVID-19 کے خلاف تحفظ صرف 4-6 ماہ کے mRNA ویکسینیشن کے بعد تقریباً 10% تک کم ہو گیا، حالانکہ شدید بیماری کے خلاف تحفظ کم از کم 7 ماہ تک 68% سے زیادہ برقرار رہا۔انکولی میموری ٹی سیل کے ردعمل کی پیمائش کرنا، جو وائرل انفیکشن کے خلاف طویل مدتی تحفظ فراہم کرتے ہیں، SARS-CoV-2 انفیکشن کے لیے حساسیت کا بہترین اشارہ ہے، اور اس لیے COVID-199 کے لیے مثبت ٹیسٹ کے خطرے کا ایک بہتر اشارہ ہے، کیونکہ مخصوص T. خلیات انفیکشن کو روک سکتے ہیں.بغیر seroconversion10,11۔تاہم، ٹی سیل کے ردعمل کی پیمائش کو طریقہ کار کی دشواریوں اور وینس خون کے نمونوں کے حصول اور نقل و حمل میں لاجسٹک مسائل کی وجہ سے کم توجہ دی گئی ہے، خاص طور پر جب ویکسین کی افادیت کا اندازہ لگانے اور قوت مدافعت کی نگرانی کے لیے بڑے مشاہداتی مطالعات کا انعقاد کیا جاتا ہے۔تاہم، ویکسین شدہ افراد SARS-CoV-2 کی مختلف اقسام کے خلاف T سیل کی مضبوط سرگرمی دکھاتے ہیں، ممکنہ طور پر COVID-1912,13 کی شدت کو محدود کرنے کے لیے اینٹی باڈی کے رد عمل کے نقصان کو پورا کرتے ہیں۔
یہاں، ہم نے یہ سمجھنے کی کوشش کی کہ آیا SARS-CoV-2 T سیل کے ردعمل کی ایک پیمائش سے خون کے نمونے لینے کے 6 ماہ کے اندر SARS-CoV-2 انفیکشن کے مکمل خطرے کی پیش گوئی کی جا سکتی ہے، قطع نظر اس سے پہلے کہ مدافعتی عوامل کو متاثر کیا جائے۔ٹی سیل ٹیسٹ کو ہائی تھرو پٹ بنانے اور بڑے مطالعات پر لاگو کرنے کے لیے، ہم نے ٹیسٹ کو چھوٹا بنانے کی بھی کوشش کی تاکہ اسے کیپلیری فنگر اسٹک خون کے نمونے کا استعمال کرتے ہوئے انجام دیا جا سکے۔
ہم نے پورے وینس خون کی بنیاد پر SARS-CoV-2 T خلیات اور IgG اینٹی باڈیز کی مشترکہ شناخت کا استعمال کرتے ہوئے صحت مند عطیہ دہندگان میں سیلولر اور مزاحیہ مدافعتی ردعمل کی پیمائش کی (شرکا کی خصوصیات کے لیے، مارچ 2022 14 دیکھیں۔ ویکسین شدہ عطیہ دہندگان میں، SARS-CoV-2- مخصوص ٹی سیلولر ردعمل کا تعین SARS-CoV-2 پیپٹائڈ (جیسا کہ پہلے، refs. 14,15,16,17,18) اور اس سے وابستہ IgG ردعمل کے ساتھ پورے خون کے محرک کے بعد پلازما انٹرفیرون-γ (IFN-γ) کی سطح کی پیمائش کے ذریعے کیا گیا تھا۔ نیوکلیو کیپسڈ (N) کے ساتھ ان لوگوں میں اضافہ ہوا جنہوں نے پچھلے انفیکشن کی اطلاع دی تھی، حالانکہ دونوں ردعمل پہلے سے متاثرہ غیر ویکسین شدہ عطیہ دہندگان میں زیادہ تھے، جسم میں زیادہ سے زیادہ (تصویر 1a،b)۔ سپائیک گلائکوپروٹینز (RBD, S1, S2) کے خلاف IgG ردعمل پہلے سے متاثرہ ویکسین والے عطیہ دہندگان میں سب سے زیادہ تھے (شکل 1c–e)۔
ایک SARS-CoV-2-مخصوص IFN-γ+ T سیل کے ردعمل کی پیمائش وینس کے پورے خون کے پرکھ سے کی گئی تھی اور شرکاء کی ویکسینیشن اور SARS-CoV-2 کے انفیکشن کی سابقہ ​​حالت (PCR اور/یا لیٹرل فلو ٹیسٹ سے تصدیق شدہ)' Vac کی بنیاد پر + /Inf +' n = 60 (سبز)، 'Vac + /Inf-' n = 82 (نیلے)، 'Vac-/Inf +' n = 4 (پیلا)، 'Vac-/Inf-' n = 1 (لاگو نہیں).SARS-CoV-2-مخصوص IgG بائنڈنگ ری ایکشنز ہدف نیوکلیو کیپسڈ ("N") (b؛ ****P <0.0001, **P = 0.0016)، اسپِکڈ ریسیپٹر بائنڈنگ ڈومین ("RBD") (c؛ ** P = 0.0022، *P <0.015)، اسپائیک سبونائٹ 1 ("S1") (d؛ ***P = 0.0005، *(Vac + /Inf+ بمقابلہ Vac + /Inf-) P = 0.022، *(Vac- /Inf+ بمقابلہ Vac+/Inf-) P = 0.012) اور چوٹی سبونائٹ 2 ("S2") (e) کی پیمائش وینس کے پورے خون کے ٹیسٹوں سے کی گئی تھی اور شرکاء کی ویکسینیشن اور اس سے پہلے کی SARS -CoV-2 (PCR اور/ سے تصدیق شدہ) کی بنیاد پر یا پس منظر کا بہاؤ ٹیسٹ) متعدی حیثیت۔'Vac + /Inf +' n = 60 (سبز)، 'Vac + /Inf-' n = 71-82 (نیلے)، 'Vac-/Inf +' n = 4 (پیلا)۔موازنہ کرسکل والس ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا، ڈن ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے متعدد موازنہ کے لیے ایڈجسٹ کیا گیا تھا۔ڈیٹا کو چارٹ کے طور پر دکھایا جاتا ہے (درمیانی پر سینٹر لائن، 75ویں پرسنٹائل پر اوپری حد، 25ویں پرسنٹائل پر نچلی حد) کم سے کم اور زیادہ سے زیادہ قدروں پر سرگوشیوں کے ساتھ۔ہر ڈاٹ ایک ڈونر کی نمائندگی کرتا ہے۔خام ڈیٹا خام ڈیٹا فائلوں کی شکل میں فراہم کیا جاتا ہے۔
خون کے نمونے لینے کے بعد، شرکاء سے کہا گیا کہ وہ COVID-19 کے لیے مثبت PCR اور/یا لیٹرل فلو ٹیسٹ کے نتائج خود رپورٹ کریں۔اگر شرکاء نے 1 ستمبر 2021 اور 29 دسمبر 2021 کے درمیان مثبت تجربہ کیا، تو انہیں 29 دسمبر 2021 کے بعد ڈیلٹا (B.1.617.2) ویرینٹ کورونا وائرس اور Omicron (B.1.1.529) سے پبلک ہیلتھ ویلز سے متاثر ہونے کا خیال کیا گیا، جب تشویش کا یہ اختیار غالب ہو جاتا ہے.148 قابل قدر عطیہ دہندگان میں سے، ہم نے خون کے عطیہ کے 6 ماہ کے اندر انفیکشن کی شرح 26.3% (39/148) دیکھی، جن میں سے 38 کو COVID-19 ویکسین کی دوسری یا تیسری خوراک ملی (انفیکشن کی پیش رفت Pfizer/BioNTech کے بعد ہوئی) BNT162b2) mRNA ویکسین یا AstraZeneca ویکسین (ChAdOx1 nCoV-19))؛ایک غیر ویکسین ڈونر بھی متاثر ہوا تھا۔SARS-CoV-2-مخصوص IFN-γ-مثبت T سیل ردعمل کی شدت ان لوگوں میں نمایاں طور پر کم تھی جنہوں نے غیر متاثرہ عطیہ دہندگان (P <0.0001؛ تصویر 2a) کی نسبت COVID-19 کے لیے مثبت تشخیصی ٹیسٹ رپورٹ کیا، بنیادی طور پر کچھ شرکاء میں ویکسینیشن کے ذریعے ٹی سیل ردعمل کی بہترین شمولیت (P = 0.050؛ ضمنی شکل 1)۔IFN-γ+ T سیل کے ردعمل کی شدت اور مثبت COVID-19 ٹیسٹ کے نتائج کے وقت کے درمیان کوئی تعلق نہیں تھا (ضمنی شکل 2)۔اس کے برعکس، نہ تو RBD-، S1-، S2-بائنڈنگ IgG ردعمل (اعداد و شمار 2b–d) اور نہ ہی RBD-، S1-غیر جانبدار اینٹی باڈی ردعمل جنگلی قسم یا ڈیلٹا SARS-CoV-2 (B.1.617) کے لیے مخصوص تھے۔) (ضمیمہ تصویر 3) انفیکشن کے خطرے میں لوگوں کے درمیان فرق کر سکتا ہے۔تاہم، SARS-CoV-2 کے خلاف کم N-linked IgG ردعمل کا تعلق COVID-19 انفیکشن کے خطرے سے ہے (P = 0.0084؛ شکل 2e)؛جن لوگوں نے مثبت تجربہ کیا ان کا امکان 85٪ کم تھا (P = 0.00035؛ یا 0.15، 95)۔% CI: 0.047–0.39 (ضمنی شکل 4)۔
صحت مند عطیہ دہندگان کے زہریلے خون کے نمونوں (n = 148) نے SARS-CoV-2-مخصوص IFN-γ+ T-سیل کے ردعمل (a; ****P <0.0001) اور اسپائک ریسیپٹر کو مخصوص SARS-CoV سے منسلک کرنے کا اندازہ لگایا۔ -2 محرک۔ڈومین ("RBD") (b)، spike 1 subunit ("S1″) (c)، spike 2 subunit ("S2″) (d)، اور nucleocapsid ("N") (e؛ **P = 0.0084) .جن شرکاء نے COVID-19 (PCR اور/یا پس منظر کے بہاؤ) کے لیے مثبت تجربہ کیا ان کی شناخت کی گئی؛تمام انفیکشن خون کے نمونے لینے کے 6 ماہ کے اندر واقع ہوئے ہیں۔دو دم والے مان-وٹنی ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے موازنہ کیا گیا۔ڈیٹا کو چارٹ کے طور پر دکھایا جاتا ہے (درمیانی پر سینٹر لائن، 75ویں پرسنٹائل پر اوپری حد، 25ویں پرسنٹائل پر نچلی حد) کم سے کم اور زیادہ سے زیادہ قدروں پر سرگوشیوں کے ساتھ۔ہر ڈاٹ ایک ڈونر کی نمائندگی کرتا ہے۔ns اہم نہیں ہے۔ہیٹ میپ f مخصوص ڈیٹاسیٹ کے متغیرات کے درمیان سپیئر مین کے درجہ کے ارتباط کو ظاہر کرتا ہے۔وہ موازنہ جو اعدادوشمار کے لحاظ سے اہم نہیں تھے میٹرکس سے خارج کر دیے گئے تھے اور خالی خلیوں کے ساتھ نشان زد کر دیا گیا تھا۔خام ڈیٹا خام ڈیٹا فائلوں کی شکل میں فراہم کیا جاتا ہے۔
14 کے پہلے سے طے شدہ تشخیصی مثبت کٹ آف کو دوبارہ انفیکشن کے خطرے کا اندازہ لگانے کے لیے بہت زیادہ صوابدیدی سمجھا جاتا تھا، لہذا خطرے کے مطلق پیرامیٹرز قائم کرنے کے لیے انٹرکوارٹائل رینجز قائم کیے گئے تھے۔شماریاتی ماڈل، جس میں صرف وہ متغیرات شامل تھے جن کا نتائج پر اہم اثر پڑتا ہے، یہ ظاہر کرتا ہے کہ SARS-CoV-2-مخصوص IFN-γ+ T سیل ردعمل کی شدت کسی فرد کے ہونے کے امکانات کا تعین کرنے کے لیے سب سے اہم مدافعتی بائیو مارکر تھا۔ COVID کے لیے ٹیسٹ کیا گیا۔-19 مثبت (شکل 2f اور ضمنی شکل 4)۔تیسرے (194-489 pg/ml IFN-γ) اور چوتھے (>489 pg/ml IFN-γ) میں SARS-CoV-2 مخصوص IFN-γ+ T سیل ردعمل والے مریض 65% (P = 0.055; یا 0.35، 95% CI: 0.11–1.00) اور 90% (P = 0.0050؛ یا 0.098, 95% CI: 0.014–0.42) میں زیادہ شرکاء تھے۔امکانات بہت کم ہیں (ضمیمہ تصویر 4)۔مجموعی طور پر، وینس خون ≤79 pg/mL IFN-γ سے SARS-CoV-2 کے مخصوص T سیل ردعمل کے ساتھ شرکاء میں 6 ماہ میں بریک تھرو انفیکشن کا 43.2 فیصد خطرہ تھا، جواب کے مقابلے> 489 pg/mL۔IFN-γ کے ml میں 5.4٪ کے انفیکشن کا خطرہ تھا (ٹیبل 2)۔
phlebotomist کے ذریعہ نمونے جمع کرنے کی ضرورت کی وجہ سے وینس کے پورے خون کی جانچ کا دائرہ محدود ہے۔SARS-CoV-2 کے لیے T سیل اور IgG ٹیسٹنگ کی دستیابی کو بڑھانے کے لیے، ایک متبادل کیپلیری خون کے نمونے لینے کا طریقہ تیار کیا گیا ہے تاکہ شرکاء کو گھر پر ہی خون کے نمونے حاصل کر سکیں۔ہمارے بہترین علم کے مطابق، کیپلیری خون کے نمونوں میں اینٹیجن سے متعلق مخصوص ٹی سیل فنکشن کی پیمائش کے بارے میں کوئی پچھلی رپورٹس نہیں ہیں۔موازنہ کیپلیری اور وینس خون کے نمونوں کا استعمال کرتے ہوئے حاصل کردہ لیمفوسائٹ شماروں کے درمیان پہلے ایک مضبوط ارتباط دکھایا گیا ہے۔اس کے علاوہ، یہ بھی بتایا گیا ہے کہ SARS-CoV-2 کے مخصوص T سیل کے ردعمل کی پیمائش کرنے والے پورے خون پر مبنی اسیسز صرف 320 μL venous خون کا استعمال کرتے ہیں، 20 کیپلیری خون کے نمونوں میں پروجنیٹر T خلیوں کی تعدد کے بارے میں خدشات کو ختم کرتے ہیں۔
ہم نے SARS-CoV-2 T خلیات اور IgG اینٹی باڈیز کے اس اعلی تھرو پٹ معیاری تعاونی پرکھ کا استعمال کیا ہے جو کیپلیری پورے خون پر مبنی ہے تاکہ شرکاء میں مختلف کموربیڈیٹیز اور پہلے سے ویکسینیشن/انفیکشن کی حیثیت (ٹیبل 1) میں سیلولر اور مزاحیہ مدافعتی ردعمل کی پیمائش کی جاسکے۔24 جنوری اور 14 مارچ 202214 کے درمیان برطانیہ بھر سے بھرتی کیا گیا۔ انگلیوں کے نمونے کی اکثریت (90.9%) درست طریقے سے حاصل کی گئی اور جمع کرنے کے 24 گھنٹوں کے اندر لیبارٹری کو بھیج دی گئی۔کچھ معاملات میں، نمونے خون کی قرعہ اندازی کے 48 گھنٹوں کے اندر موصول ہوئے تھے، لیکن ان میں سے کوئی بھی نمونہ کوالٹی کنٹرول چیک میں کامیاب نہیں ہوا اور مجموعی طور پر ٹی سیل یا اینٹی باڈی کی پیمائش کو متاثر نہیں کیا (ضمنی شکل 5)۔اگرچہ SARS-CoV-2-مخصوص IFN-γ+ T سیل کے ردعمل کی شدت میں کچھ افراد میں متعلقہ کیپلیری اور وینس خون کے نمونوں میں ماپا گیا تھا، مجموعی طور پر کوئی خاص فرق نہیں تھا (P = 0.88؛ ضمنی شکل 6۔ )۔)۔
SARS-CoV-2-مخصوص IFN-γ+ T سیل کے ردعمل میں ویکسین شدہ افراد میں نمایاں اضافہ ہوا جنہوں نے پچھلے انفیکشن (P = 0.0001) کی بھی اطلاع دی، لیکن پہلے سے متاثرہ غیر ویکسین شدہ عطیہ دہندگان کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ نہیں ( P = 0.19، تصویر۔ 3a)۔)۔اسپائک گلائکوپروٹین (RBD, S1, S2) کے خلاف IgG ردعمل غیر ویکسین شدہ عطیہ دہندگان کے مقابلے میں نمایاں طور پر زیادہ تھے، قطع نظر اس سے پہلے کہ انفیکشن کی حالت (شکل 3b-d)۔دلچسپ بات یہ ہے کہ ویکسین لگائے گئے شرکاء کے مقابلے میں پہلے سے متاثرہ غیر ویکسین شدہ شرکاء میں اوسط N- پابند IgG ردعمل سب سے زیادہ تھا، حالانکہ یہ اہمیت تک نہیں پہنچا تھا (شکل 3e)۔غیر ویکسین شدہ اور غیر متاثرہ عطیہ دہندگان میں جنہوں نے خود اعلان کیا، 37 میں سے 15 (40.5%) شرکاء N-linked IgG کے لیے مثبت تھے، جو پہلے سے قائم کردہ 2.0 BAU/mL14 کی حد سے زیادہ تھے۔ان 15 شرکاء میں سے بارہ مریضوں نے 22.7 pg/mL IFN-γ14 کی پہلے سے قائم کردہ حد سے اوپر IFN-γ+ T سیل ردعمل کے لیے مثبت تجربہ کیا۔لہذا، یہ امکان ہے کہ یہ شرکاء پہلے SARS-CoV-2 سے متاثر ہوئے تھے اور ذاتی پسند، PCR اور/یا پس منظر کے بہاؤ کے آلات کی کمی، یا غیر علامتی ہونے کی وجہ سے ان کا COVID-19 کا تجربہ نہیں کیا گیا تھا۔اگرچہ غیر ویکسین شدہ عطیہ دہندگان میں IFN-γ+ اور N-linked IgG کی سطحوں پر T سیل کے ردعمل کے درمیان ایک اہم ارتباط تھا (P = 0.0044؛ ضمنی اعداد و شمار، N-linked IgG ردعمل N-linked IgG ردعمل سے زیادہ تیزی سے کم ہوا، جبکہ IFN-γ + ٹی سیل کے ردعمل کو ویکسینیشن کی حیثیت سے قطع نظر برقرار رکھا گیا، حالانکہ چیلنج کے بعد 50 ہفتوں میں عطیہ دہندگان کی تعداد کم تھی (ضمنی شکل 8)۔ ویکسینیشن کی قسم عام طور پر SARS-CoV-2، T کے لیے مخصوص مشاہدہ شدہ IgG ردعمل میں تھوڑی مختلف تھی۔ خلیات اور RBD سے وابستہ، اگرچہ شرکاء جنہوں نے BNT162b2 کی دو خوراکیں حاصل کیں جس کے بعد mRNA1273 ری ویکسینیشن کی گئی، IFN-γ + T خلیات کی نمایاں طور پر اعلی سطح ظاہر کی گئی ان لوگوں کے مقابلے SARS-CoV-2 کے لیے زیادہ حساس تھے جنہوں نے ChAdOx1 اور BNT162b2 کی دو خوراکیں حاصل کیں۔ تصویر 9) اس کے علاوہ، صحت مند عطیہ دہندگان (ضمیمہ انجیر 10) کے مقابلے میں مشاہدہ شدہ ٹی سیل ردعمل میں رپورٹ کردہ کموربیڈیٹیز میں تھوڑا سا فرق تھا۔
ایک SARS-CoV-2-مخصوص IFN-γ+ T سیل کے ردعمل کو پورے خون کی کیپلیری پرکھ سے ماپا گیا تھا اور یہ شرکاء کی ویکسینیشن اور SARS-CoV-2 سے پہلے کی متعدی حیثیت (PCR اور/یا لیٹرل فلو ٹیسٹ سے تصدیق شدہ) پر مبنی تھے۔'Vac + /Inf +' n = 42 (سبز)، 'Vac + /Inf-' n = 158 (نیلے)، 'Vac-/Inf +' n = 33 (پیلا)، 'Vac- /Inf-' n = 37 (گرے)۔****P <0.0001, ***P = 0.0001, *(Vac+/Inf- vs. Vac-/Inf-) P = 0.045, *(Vac-/Inf+ بمقابلہ Vac- /Inf-) P = 0.014 .SARS-CoV-2 سپائیک ریسیپٹر بائنڈنگ ڈومین ("RBD") پر مخصوص IgG بائنڈنگ ری ایکشنز (b؛ ****P <0.0001، ns: اہم نہیں)، اسپائک سبونائٹ 1 ("S1") (c؛ * * **P <0.0001، ns: اہم نہیں)، اسپائک سبونائٹ 2 ("S2″) (d؛ ****P <0.0001، ***P = 0.0005، *P = 0.016) اور نیوکلیو کیپسڈ ("N") (e؛ ****P <0.0001، ns اہم نہیں) کی پیمائش venous پورے خون کے تجزیے کا استعمال کرتے ہوئے کی گئی تھی اور شرکاء کی ویکسینیشن اور اس سے پہلے کی SARS-CoV-2 (PCR اور/یا پس منظر کے بہاؤ کے تجزیہ سے تصدیق شدہ) انفیکشنز کو ذیلی تقسیم کیا گیا تھا۔ حالت.'Vac + /Inf +' n = 46 (سبز)، 'Vac + /Inf-' n = 182 (نیلے)، 'Vac-/Inf +' n = 34 (پیلا)، 'Vac-/Inf-' n = 37 (گرے)۔موازنہ کرسکل والس ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا تھا، ڈن ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے متعدد موازنہ کے لیے ایڈجسٹ کیا گیا تھا۔ڈیٹا کو چارٹ کے طور پر دکھایا جاتا ہے (درمیانی پر سینٹر لائن، 75ویں پرسنٹائل پر اوپری حد، 25ویں پرسنٹائل پر نچلی حد) کم سے کم اور زیادہ سے زیادہ قدروں پر سرگوشیوں کے ساتھ۔ہر ڈاٹ ایک ڈونر کی نمائندگی کرتا ہے۔خام ڈیٹا خام ڈیٹا فائلوں کی شکل میں فراہم کیا جاتا ہے۔
پہلے کی طرح، شرکاء کو COVID-19 کے لیے مثبت PCR اور/یا پس منظر میں خون کے بہاؤ کے نتائج کی اطلاع دینے کو کہا گیا تھا۔یو کے ہیلتھ ایجنسی کے مطابق، مثبت وائرس کے مختلف قسم کی جانچ کے وقت شرکاء کو Omicron کورونا وائرس (B.1.1.529) سے متاثر ہونے کا اندازہ لگایا گیا تھا، کیونکہ مطالعہ کے دورانیہ میں یہ برطانیہ میں غالب قسم تھا۔299 قابل قدر عطیہ دہندگان میں سے، ہم نے کیپلیری عطیہ کے تین ماہ کے اندر انفیکشن کی شرح 8.0% (24/299) دیکھی، جن میں سے سات کو ٹیکہ نہیں لگایا گیا تھا۔تمام شرکاء کے درمیان comorbidities کا تناسب ان لوگوں میں کم تھا جنہوں نے COVID-19 کے لیے مثبت تجربہ کیا (10.7%) ان لوگوں کے مقابلے جنہوں نے COVID-19 کے لیے منفی تجربہ کیا (24.4%، جدول 1)، جو اس حقیقت کی وجہ سے ہو سکتا ہے کہ کچھ شرکاء بیماریاں زیادہ محتاط ہیں اور ممکنہ نتائج جیسے ذیابیطس اور کینسر سے بچاتی ہیں۔جیسا کہ وینس خون کے گروہ میں مشاہدہ کیا گیا ہے، SARS-CoV-2-مخصوص انٹرفیرون-γ (IFN-γ) مثبت T خلیات کی پیمائش ان افراد کے کیپلیری خون کے نمونوں میں کی گئی ہے جو COVID-19 کے لیے مثبت تشخیصی ٹیسٹ کی رپورٹ کر رہے ہیں۔ویکسینیشن اور/یا پہلے کے انفیکشن (ضمنی شکل 11) کے ذریعہ ٹی سیل کے ردعمل کی نسبتاً ناقص شمولیت کی وجہ سے ردعمل کی شدت غیر متاثرہ عطیہ دہندگان (P = 0.034؛ شکل 4a) کے مقابلے میں نمایاں طور پر کم تھی۔اسی طرح، نہ تو RBD-، S1-، S2-بائنڈنگ IgG ردعمل (اعداد و شمار 4b–d) اور نہ ہی RBD-، S1-غیر جانبدار اینٹی باڈی ردعمل جنگلی قسم یا ڈیلٹا SARS-CoV-2 (B. 1.617) کے لیے مخصوص تھے۔(ضمنی شکل 12)۔انفیکشن کے کسی بھی اہم خطرے والے افراد کی شناخت کی جا سکتی ہے۔venous cohort کے برعکس، N سے متعلق IgG ردعمل بھی COVID-19 کے خطرے (شکل 4e) میں فرق نہیں کرتے، یہ تجویز کرتا ہے کہ Omicron ویرینٹ (B.1.1.529) پہلے سے متاثرہ افراد میں مدافعتی چوری کو بڑھاتا ہے، جیسا کہ حال ہی میں 21 کو بیان کیا گیا ہے۔ اس کے برعکس، SARS-CoV-2-مخصوص IFN-γ T سیل ردعمل کی طاقت ایک بار پھر COVID-19 (شکل 4f) کے مثبت ٹیسٹ کی انفرادی مشکلات کا تعین کرنے میں سب سے اہم متغیر تھی۔مجموعی طور پر، SARS-CoV-2-مخصوص کیپلیری T-سیل رسپانس ≤23.7 pg/mL IFN-γ کے ساتھ شرکاء میں 141.6 pg/mL ردعمل کے مقابلے میں تین ماہ میں انفیکشن کا 14.9 فیصد خطرہ تھا۔ملی لیٹر IFN-γ میں 4.4% کے انفیکشن کا خطرہ تھا (ٹیبل 2)۔
SARS-CoV-2 (a; *P = 0.034) اور SARS-CoV-2 کے لیے مخصوص IFN-γ+ T سیل جوابات مخصوص IgG-ٹارگیٹڈ ریسیپٹر بائنڈنگ ڈومین ("RBD") (b)، اسپائیک سبونائٹ 1 (' S1′) (c)، اسپائک سبونائٹ 2 ('S2′) (d) اور نیوکلیو کیپسڈ بائنڈنگ ری ایکشن ('N') (e)۔COVID-19 ٹیسٹ (PCR اور/یا لیٹرل بلڈ فلو ٹیسٹ) کے لیے مثبت کے طور پر شناخت کیے گئے شرکاء، تمام انفیکشنز خون کے نمونے لینے کے 3 ماہ کے اندر پائے گئے۔دو دم والے مان-وٹنی ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے موازنہ کیا گیا۔ڈیٹا کو چارٹ کے طور پر دکھایا جاتا ہے (درمیانی پر سینٹر لائن، 75ویں پرسنٹائل پر اوپری حد، 25ویں پرسنٹائل پر نچلی حد) کم سے کم اور زیادہ سے زیادہ قدروں پر سرگوشیوں کے ساتھ۔ہر ڈاٹ ایک ڈونر کی نمائندگی کرتا ہے۔ns اہم نہیں ہے۔ہیٹ میپ f مخصوص ڈیٹاسیٹ کے متغیرات کے درمیان سپیئر مین کے درجہ کے ارتباط کو ظاہر کرتا ہے۔وہ موازنہ جو اعدادوشمار کے لحاظ سے اہم نہیں تھے میٹرکس سے خارج کر دیے گئے تھے اور خالی خلیوں کے ساتھ نشان زد کر دیا گیا تھا۔خام ڈیٹا خام ڈیٹا فائلوں کی شکل میں فراہم کیا جاتا ہے۔
جیسے ہی ہم COVID-19 وبائی مرض کے اگلے مرحلے میں داخل ہوں گے، توجہ روک تھام سے انفرادی رسک مینجمنٹ اور معاشرے کے کمزور ارکان کی شناخت پر منتقل ہو جائے گی۔ان اعلی رسک گروپس کی مؤثر طریقے سے شناخت اور علاج کرنے کے لیے COVID-19 سے استثنیٰ کے باہمی تعلق کو قائم کرنا بہت ضروری ہے۔اب اس بات کے بڑھتے ہوئے شواہد موجود ہیں کہ T-cell کی قوت مدافعت SARS-CoV-2 انفیکشن سے بچاتی ہے اور COVID-1910 کی شدت کو محدود کرتی ہے۔یہاں پیش کردہ اعداد و شمار یہ ظاہر کرتے ہیں کہ SARS-CoV-2-مخصوص IFN-γ+ T سیل کے ردعمل کی مشترکہ طاقت سپائیک، جھلی اور نیوکلیو کیپسڈ ساختی پروٹین کے خلاف COVID-19 کے خلاف اینٹی باڈی بائنڈنگ سے زیادہ تحفظ فراہم کرتی ہے۔ .اور انفرادی اور/یا ریوڑ کی قوت مدافعت کا اندازہ لگاتے وقت اسے مدنظر رکھا جانا چاہیے۔RNA وائرس جیسے SARS-CoV-2 یا انفلوئنزا اے وائرس (IAV) اینٹی باڈیز کے ذریعے پہچانے جانے والے سطح کے اینٹیجنز پر تیزی سے بے نقاب بی سیل ایپیٹوپس کو تیار کرکے سیرولوجیکل نیوٹرلائزیشن سے بچتے ہیں۔ٹی خلیوں کے ذریعہ فراہم کردہ حفاظتی مدافعتی ردعمل وائرل پروٹین کے زیادہ محفوظ علاقوں سے ایپیٹوپس کو نشانہ بنانے کی عکاسی کر سکتا ہے جو جلد سے مدافعتی ردعمل سے بچ نہیں سکتے ہیں۔ناول SARS-CoV-2 ویریئنٹس کے خلاف T سیل ثالثی تحفظ IAV22,23 ذیلی قسموں میں نظر آنے والے محفوظ اندرونی پروٹینوں کی T سیل کے ذریعے ثالثی کی گئی heterosubtypic تحفظ کی طرح ہے۔
COVID-19 کے خلاف سیلولر مدافعتی ردعمل کی پیمائش کرنے کی بہت زیادہ صلاحیت کے باوجود، درست، اعلی تھرو پٹ، معیاری ٹی سیل اسسیس کی ترقی پر نسبتاً کم توجہ دی گئی ہے۔T سیل کے ردعمل کی پیمائش سے منسلک روایتی پیچیدگیاں اور اخراجات بڑی آبادی کے استثنیٰ کی اسکریننگ کرتے وقت T سیل کے استثنیٰ کے درست تعین کو روکتے ہیں۔اگرچہ حال ہی میں متعدد کمرشل پورے خون کے پیپٹائڈ محرک اسسز دستیاب ہوئے ہیں، فی الحال ہر ایک کو خون حاصل کرنے کے لیے فلیبوٹومسٹ کی ضرورت ہوتی ہے، دستیابی اور پیمانے کو محدود کرتے ہوئے۔کیپلیری بلڈ سسٹم کو آبادی میں SARS-CoV-2 اینٹی باڈیز کے پھیلاؤ کا تعین کرنے کے لیے بڑے پیمانے پر استعمال کیا جاتا ہے۔ہم نے SARS-CoV-2 ساختی پروٹین اور SARS-CoV-2 کے مخصوص اینٹی باڈی ردعمل کے لیے T سیل کے رد عمل کا اندازہ لگانے کے لیے پورے خون کے پیپٹائڈ محرک اسسیس کو انجام دینے کے لیے کیپلیری بلڈ اسسیس کو ڈھال لیا۔درحقیقت، ایک ہی کیپلیری خون کے نمونے میں SARS-CoV-2-مخصوص اینٹی باڈیز اور T سیلز کی مشترکہ پیمائش بہت پرکشش ہے: (i) فی شریک خون کے متعدد ٹیسٹ کی ضرورت کو کم کرتی ہے، (ii) شرکاء کے تجربے اور سمجھ کو بہتر بناتی ہے۔(iii) لاجسٹکس کو بہتر بنائیں اور نقل کو کم کریں، (iv) ماحولیاتی اثرات کو کم کریں کیونکہ کم لیبارٹری استعمال کی اشیاء اور نمونے کی ترسیل کی ضرورت ہے۔اگرچہ مجموعی طور پر IFN-γ رد عمل مماثل وینس اور کیپلیری خون کے نمونوں کے درمیان یکساں تھا، لیکن یہ وینس بلڈ کوہورٹ (تصویر 2a) کے مقابلے شرکاء کے کیپلیری بلڈ کوہورٹ (تصویر 4a) میں کم دیکھا گیا۔IFN-γ اقدار اس تلاش کے لیے کئی وضاحتیں ہیں، یعنی، کموربیڈیٹیز کے حامل شرکاء کی ایک بڑی تعداد کو کیپلیری خون کے نمونے لینے والے گروہ (ٹیبل 1) میں بھرتی کیا گیا تھا اور عروقی سے حاصل کردہ ٹی خلیوں کی قابل عملیت اور/یا فنکشن نمونے کم ہوسکتے ہیں، خاص طور پر پیپٹائڈ محرک سے پہلے نمونوں کے طویل مدتی ذخیرہ کرنے کی شرائط کو مدنظر رکھتے ہوئے
فی الحال وسیع پیمانے پر دستیاب COVID-19 ویکسین زیادہ تر وصول کنندگان کو ویکسینیشن کے 6 ماہ کے اندر شدید بیماری کے خلاف بہترین تحفظ فراہم کرتی ہے۔حوصلہ افزا بات یہ ہے کہ SARS-CoV-26,7 کی ویکسین کی وجہ سے سیرولوجیکل نیوٹرلائزیشن کے خراب ہونے کے باوجود، جنگلی قسم کے SARS-CoV-2 کے خلاف ویکسینیشن کے ذریعے حاصل ہونے والے T-cell کے ردعمل انتہائی رد عمل کا شکار رہے، جیسا کہ 25 دیگر سامنے آئے۔جو ڈیٹا ہم یہاں پیش کرتے ہیں وہ ویکسین امیونوجنیسیٹی کے وسیع تر جائزے کی اہمیت کو ظاہر کرتے ہیں، اچانک انفیکشن اور وائرس کی مسلسل منتقلی کو روکنے کے لیے ناکافی ٹی سیل کی قوت مدافعت والی ویکسین کو نمایاں کرتے ہیں۔ہم نے یہ بھی مشاہدہ کیا کہ کیپلیری کوہورٹ میں بھرتی کیے گئے بہت سے غیر ویکسین شدہ افراد کو SARS-CoV-2-مخصوص T خلیات (اور N-binding IgG) کا نمایاں ردعمل تھا، اس سے قطع نظر سابقہ ​​ویکسینیشن، جو ممکنہ طور پر پچھلے انفیکشن کی وجہ سے ہے۔مناسب افراد کو ویکسین لگانے کے بجائے، ان کے انفیکشن کے خطرے کا اندازہ ان کی موجودہ حفاظتی ٹیکوں کی حیثیت اور کیے گئے باخبر انتخاب کی بنیاد پر کیا جانا چاہیے۔
اس مطالعہ کی حدود میں یہ یقین دہانی شامل ہے کہ شرکاء نے SARS-CoV-2 کے ساتھ خون جمع کرنے کے بعد خود سے انفیکشن کی اطلاع دی تاکہ استثنیٰ کی مطابقت کا تعین کیا جا سکے۔کچھ شرکاء کو غیر علامتی انفیکشن ہو سکتا ہے اور وہ COVID-19 کے لیے PCR اور/یا پس منظر کے بہاؤ کی جانچ سے گزرنے سے قاصر ہیں۔ہمارے ڈیٹاسیٹ میں خون کے نمونے لینے کے وقت شرکاء کی دوائیوں کے بارے میں بھی معلومات کی کمی تھی۔اس کے علاوہ، یہ دیکھتے ہوئے کہ ہمارے تمام شرکاء نے صرف ہلکی/اعتدال پسند علامات کی اطلاع دی ہے یا کوئی علامات نہیں ہیں، ہمارے ڈیٹا سیٹ سے مدافعتی ردعمل کی نشاندہی کرنا ممکن نہیں تھا جس نے COVID-19 کے لیے شدید بیماری اور ہسپتال میں داخل ہونے کے بڑھتے ہوئے خطرے کی پیش گوئی کی تھی۔تاہم، نیوکلیو کیپسڈ مخصوص ایپیٹوپس کے خلاف CD8+ T سیل ردعمل کی موجودگی کو حال ہی میں شدید COVID-1926 کے خلاف تحفظ سے منسلک کیا گیا ہے۔اس کے علاوہ، یہاں استعمال ہونے والے پرکھ نے مخصوص ابتدائی اظہار کردہ SARS-CoV-2 غیر ساختی پروٹینوں کے T سیل کے ردعمل کی پیمائش نہیں کی جو حال ہی میں سیرونگیٹیو ہیلتھ کیئر ورکرز میں ترجیحی طور پر جمع ہوتے دکھائے گئے ہیں جو متاثرہ مریضوں کے ساتھ رابطے میں رہے ہیں۔اس کام کی بنیاد پر، بھرتی کے وقت کمیونٹی ٹرانسمیشن کے پھیلاؤ اور آبادی میں رابطے کے انفیکشن کے زیادہ امکانات کو دیکھتے ہوئے، ہمارے ٹیسٹوں میں پائے جانے والے SARS-CoV-2 مخصوص T سیلوں کی تعداد بھی کلیئرنس کے قابل دکھائی دیتی ہے۔ہمارے ساتھیوں میں ذیلی کلینیکل انفیکشن۔آخر میں، ہم نے ٹی سیلز کے ذریعے انٹرلییوکن 2 کی پیداوار کی پیمائش نہیں کی کیونکہ ہمارے پچھلے کام نے SARS-CoV-214-مخصوص T-cell ردعمل کی خراب شناخت کا مظاہرہ کیا، حالانکہ IL-2-مخصوص ردعمل پہلے سے موجود کراس ری ایکٹیویٹی کی نشاندہی کر سکتے ہیں۔SARS-CoV-211 انفیکشن کے خلاف دفاع سے وابستہ خلیات۔
ایک ساتھ مل کر، یہ اعداد و شمار طویل مدتی طولانی مطالعات کی بنیادی ضرورت کو اجاگر کرتے ہیں جو کہ SARS-CoV-2 کے مخصوص T سیل ردعمل کو آبادی کے پیمانے پر استثنیٰ کے اقدامات میں شامل کرتے ہیں۔ان کوششوں کو ایک نئے کیپلیری بلڈ ٹیسٹ کی ترقی سے مدد مل سکتی ہے جو ٹی سیل کے ردعمل کی پیمائش کرتی ہے۔
تحقیقی پروجیکٹ نے فروری 2021 سے مارچ 2022 تک شرکاء کو بھرتی کیا۔ صحت مند عطیہ دہندگان (n = 148) جنہوں نے وینس خون کے نمونے عطیہ کیے ان میں بنیادی طور پر یونیورسٹی کا عملہ اور کارڈف یونیورسٹی کی COVID-19 اسکریننگ سروس میں حصہ لینے والے طلباء یا پرائمری اسکول کے عملے پر مشتمل تھا۔ کارڈف۔تمام شرکاء بصورت دیگر صحت مند تھے اور انہوں نے مدافعتی ادویات لینے کی اطلاع نہیں دی (خصوصیات کے لیے جدول 1 دیکھیں)۔کیپلیری خون کے نمونے عطیہ کرنے والے شرکاء کے گروپ میں برطانیہ بھر سے تمام رضاکارانہ عطیہ دہندگان (عمر 18+) شامل تھے۔24 جنوری سے 14 مارچ 2022 کے درمیان، 342 شرکاء نے مطالعہ میں داخلہ لیا، جن میں سے 299 نے خون کے نمونے لیبارٹری میں جمع کرائے تھے۔بہت سے شرکاء کو ویکسین نہیں دی گئی اور/یا سنگین بیماری کی اطلاع دی گئی، بشمول آٹومیون امراض اور کینسر (خصوصیات کے لیے جدول 1 دیکھیں)۔اس مطالعہ کو نیو کیسل اور نارتھ ٹائنسائیڈ 2 ریسرچ ایتھکس کمیٹی (ID IRAS: 294246) اور کارڈف یونیورسٹی سکول آف میڈیسن ریسرچ ایتھکس کمیٹی (SREC ref: SMREC 21/01) سے اخلاقی منظوری ملی۔تمام شرکاء نے شمولیت سے پہلے تحریری باخبر رضامندی دی۔اس مطالعہ میں حصہ لینے کے لیے شرکاء کو کوئی معاوضہ نہیں ملا۔
وینس خون کے نمونے وینی پنکچر کے ذریعے 6 یا 10 ملی لیٹر لیتھیم یا سوڈیم ہیپرین ویکیٹینرز (BD) میں حاصل کیے گئے تھے۔کیپلیری خون کے نمونے انگلی لینسیٹ کے ساتھ حاصل کیے گئے اور پھر ہیپرین مائکرو کنٹینرز (بی ڈی) میں جمع کیے گئے۔کم از کم 400 μl خون درکار ہے۔اس رقم سے کم کوئی بھی نمونہ مسترد کر دیا جائے گا۔نمونے کے مسترد ہونے کی دیگر وجوہات میں بڑے پیمانے پر جمنا اور/یا ہیمولائسز اور تجزیہ کے لیے چپکنے والے پلازما کو جمع کرنے میں ناکامی شامل ہیں (ضمیمہ تصویر 5)۔اینٹی باڈی کے ردعمل کا اندازہ لگانے کے لیے کل 299 کیپلیری خون کے نمونے دستیاب تھے، جن میں سے 270 نمونے ٹی سیل کے ردعمل کا اندازہ لگانے کے لیے بھی دستیاب تھے۔
SARS-CoV-2 کے مخصوص T سیل ردعمل کا اندازہ COVID-19 Immuno-T پرکھ (ImmunoServ Ltd) کا استعمال کرتے ہوئے کیا گیا اور جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا تھا 14۔مختصراً، ایک 6 ملی لیٹر یا 10 ملی لیٹر سوڈیم ہیپرین (بی ڈی) وینس ویکیٹینر ہر شریک سے لیا گیا اور خون جمع کرنے کے 12 گھنٹے کے اندر لیبارٹری میں اس پر کارروائی کی گئی۔اگرچہ زیادہ تر نمونوں پر 24 گھنٹوں کے اندر کارروائی کی گئی تھی، لیکن فنگر اسٹک کے نمونے لینے کے 48 گھنٹوں کے اندر ایک 400-600 μl ہیپرینائزڈ مائکرو بلیڈنگ (BD) کیپلیری خون جمع کیا گیا تھا۔وینس اور/یا کیپلیری خون کے نمونے SARS-CoV-2 (جنگلی قسم کے مختلف) کے لیے مخصوص پیپٹائڈ پولز کے ساتھ متحرک کیے گئے تھے جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے14۔اس پیپٹائڈ لائبریری میں 11 اوور لیپنگ امینو ایسڈز کے ساتھ 420 15-میر کی ترتیبیں ہیں جو پورے اسپائیک پروٹین (S1 اور S2) پر پھیلے ہوئے ہیں (S؛ NCBI پروٹین: QHD43416 1)، nucleocapsid phosphoprotein (NP؛ NCBI پروٹین: QHDe43M) ؛ NCBI پروٹین: QHD43419 1) کوڈنگ کی ترتیب (جسے "S-/NP-/M-combinatorial peptide library" کہا جاتا ہے)۔تمام پیپٹائڈس کو> 70% تک صاف کیا گیا، جراثیم سے پاک پانی میں تحلیل کیا گیا اور 0.5 μg/ml فی پیپٹائڈ کی حتمی حراستی پر استعمال کیا گیا۔نمونے 20-24 گھنٹے کے لیے 37 ° C پر لگائے گئے تھے۔اس کے بعد ٹیوبوں کو 3 منٹ کے لیے 5000×g پر سینٹرفیوج کیا گیا اور ہر خون کے نمونے کے اوپر سے 150 µl پلازما جمع کیا گیا۔سائٹوکائن/اینٹی باڈی کا پتہ لگانے کے اسسیس کو چلانے سے پہلے پلازما کے نمونے -20°C پر ایک ماہ تک اسٹور کریں۔
IFN-γ کو IFN-γ ELISA MAX ڈیلکس سیٹ (BioLegend، کیٹلاگ نمبر 430116) کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا اور مینوفیکچرر کی ہدایات کے مطابق انجام دیا گیا۔سٹاپ سلوشن (2N H2SO4) کو شامل کرنے کے فوراً بعد، بائیو لیجنڈ منی ELISA پلیٹ ریڈر کا استعمال کرتے ہوئے مائکروپلیٹ کو 450 nm پر پڑھا گیا۔IFN-γ کو گراف پیڈ پرزم کا استعمال کرتے ہوئے معیاری منحنی خطوط کے ذریعہ مقدار میں طے کیا گیا تھا۔پرکھ کی نچلی پتہ لگانے کی حد سے نیچے کی قدروں کو 7.8 pg/ml کے طور پر ریکارڈ کیا گیا، پرکھ کی اوپری پتہ لگانے کی حد سے اوپر کی قدریں 1000 pg/ml کے طور پر ریکارڈ کی گئیں۔
اینٹی SARS-CoV-2 RBD/S1/S2/N IgG اینٹی باڈیز کو Bio-Plex Pro Human IgG SARS-CoV-2 4-plex پینل (Bio-Rad، cat. نمبر 12014634) کا استعمال کرتے ہوئے ماپا گیا اور اس کے مطابق لیبل لگایا گیا۔ کارخانہ دار کی ہدایات.ہدایاتمقدار کی حد سے اوپر رپورٹ کرنے والے نمونوں کا دوبارہ تجزیہ 1:1000 میں کیا گیا۔موتیوں کی اوسط فلوروسینس کی شدت کو Bio-Plex 200 آلہ (Bio-Rad) پر ماپا گیا تھا۔اینٹی باڈی کی تعداد کا حساب VIROTROL SARS-CoV-2 سنگل کنٹرول پرکھ (Bio-Rad) کے ذریعے کیا گیا اور مینوفیکچرر کے کیلیبریشن فیکٹر کا استعمال کرتے ہوئے WHO/NIBSC 20/136 انٹرنیشنل ریفرنس سٹینڈرڈ یونٹس (BAU/mL) میں تبدیل کر دیا گیا۔
SARS-CoV-2 وائلڈ ٹائپ اور ڈیلٹا (B.1.617) کے خلاف RBD اور S1 ذیلی یونٹ مخصوص غیر جانبدار اینٹی باڈیز کو Bio-Plex Pro Human SARS-CoV-2 ویرینٹ نیوٹرلائزیشن اینٹی باڈی کٹ (Bio) کا استعمال کرتے ہوئے ناپا گیا۔ -Rad، حصہ نمبر 12016897)، مینوفیکچرر کی ہدایات کے مطابق۔Bio-Plex 200 (Bio-Rad) پر اوسط فلوروسینس کی شدت کی پیمائش کریں اور درج ذیل فارمولے کا استعمال کرتے ہوئے فیصد کی روک تھام (یعنی غیر جانبداری) کا حساب لگائیں:
SARS-CoV-2 کے لیے متعدی نیوٹرلائزیشن اسیس انجام دیے گئے جیسا کہ پہلے بیان کیا گیا ہے۔مختصراً، جنگلی قسم کے SARS-CoV-2 کے 600 PFU کو 37 ڈگری سینٹی گریڈ پر 1 گھنٹے کے لیے ڈپلیکیٹ میں پلازما کے 3 گنا سیریل ڈائیوشنز کے ساتھ انکیوبیٹ کیا گیا۔اس کے بعد اس مرکب کو VeroE6 خلیوں میں 48 گھنٹے کے لیے شامل کیا گیا۔Monolayers کو 4% paraformaldehyde کے ساتھ طے کیا گیا تھا، 0.5% NP-40 کے ساتھ پارمیبلائز کیا گیا تھا اور بلاکنگ بفر میں 1 گھنٹے تک انکیوبیٹ کیا گیا تھا (PBS جس میں 0.1% tween اور 3% سکمڈ دودھ ہوتا ہے)۔پرائمری اینٹی باڈی (اینٹی نیوکلیو کیپسڈ 1C7، اسٹریٹیک) کو کمرے کے درجہ حرارت پر 1 گھنٹے کے لیے بلاک کرنے والے بفر میں شامل کیا گیا۔دھونے کے بعد، ایک ثانوی اینٹی باڈی (اینٹی ماؤس IgG-HRP، Pierce) کو 1 گھنٹے کے لیے بلاک کرنے والے بفر میں شامل کیا گیا۔مونولیئرز کو دھویا گیا، سگما فاسٹ او پی ڈی کا استعمال کرتے ہوئے تیار کیا گیا اور کلیریو اسٹار اومیگا پلیٹ ریڈر پر پڑھا گیا۔بغیر وائرس کے کنویں، وائرس کے بغیر لیکن اینٹی باڈیز کے بغیر، اور نارملائزڈ سیرا جو انٹرمیڈیٹ سرگرمی دکھاتے ہیں ہر تجربے میں بطور کنٹرول شامل تھے۔
گراف پیڈ پرزم (ورژن 9.4.1) میں شماریاتی تجزیہ کیا گیا۔شیپیرو ولک ٹیسٹ کا استعمال کرتے ہوئے ڈیٹا سیٹ کی معمول کی جانچ کی گئی۔تمام موازنہ کے لیے غیر پیرامیٹرک معیار استعمال کیے گئے تھے۔Mann-Whitney ٹیسٹ بغیر جوڑے کے نمونوں کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔تمام ٹیسٹ P ≤ 0.05 کی معمولی اہمیت کی حد کے ساتھ دو طرفہ تھے۔
ڈیٹاسیٹ کا ابتدائی تحقیقی تجزیہ R (ورژن 4.0.3) میں کیا گیا تھا۔اس میں اسپیئر مین کے غیر متغیر درجہ کے ارتباطی میٹرکس کی ترقی شامل ہے، جہاں دو متغیرات کے درمیان ارتباط کو مربعوں کے سائز اور رنگ سے ظاہر کیا جاتا ہے۔ایسوسی ایشنز کے درمیان شماریاتی اہمیت کا تخمینہ Spearman's rho کا استعمال کرتے ہوئے لگایا گیا تھا، جہاں اقدار ≤0.05 کو اہم سمجھا جاتا تھا۔وہ موازنہ جو اعدادوشمار کے لحاظ سے اہم نہیں تھے میٹرکس سے خارج کر دیے گئے تھے اور خالی خلیوں کے ساتھ نشان زد کر دیا گیا تھا۔ہولم کی تصحیح کا استعمال کرتے ہوئے متعدد موازنہ کے لیے P-values ​​کو ایڈجسٹ کیا گیا۔ایک بائنری لاجسٹک ریگریشن ماڈل کا استعمال ڈیٹاسیٹ میں موجود متغیرات کے اثر کو COVID-19 کے مثبت ردعمل پر نقل کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔IFN-γ T سیل کے جوابات اور اینٹی RBD/S1/S2/N IgG ٹائٹر اسکورز کو عوامل میں تبدیل کیا گیا، جہاں ہر فرد کو ہر اسکور کے لیے مناسب کوارٹائل تفویض کیا گیا تھا۔اس کے بعد، شماریاتی پیکیج (V4.0.3) میں glm فنکشن کا استعمال کرتے ہوئے ایک ابتدائی تحقیقی ماڈل تیار کیا گیا۔اس اصل ماڈل سے اخذ کردہ مشکلات کے تناسب کو OddsPlotty پیکیج (V1.0.2) میں 'odds_plot' فنکشن کا استعمال کرتے ہوئے ماڈل کے گتانک سے نکالا گیا تھا۔کراس-ویلیڈیشن ماڈل تیار کرتے وقت، ہم نے صارف کے تعصب کو محدود کرنے اور اس بات کو یقینی بنانے کے لیے bestglm پیکیج (V0.37.3) سے "bestglm" فنکشن کا استعمال کیا اور اس بات کو یقینی بنایا کہ پیشین گوئی کرنے والوں کا بہترین ذیلی سیٹ منتخب کیا جا سکتا ہے۔منتخب کردہ طریقہ "مکمل" تھا اور ماڈل فٹ کا اندازہ لگانے کے لیے استعمال ہونے والا معلوماتی معیار AIC تھا۔اوپر بیان کردہ وہی ورک فلو مشکلات کا تناسب حاصل کرنے کے لیے استعمال کیا گیا تھا۔
مطالعہ کے ڈیزائن کے بارے میں مزید معلومات کے لیے، اس مضمون سے منسلک نیچر اسٹڈی خلاصہ دیکھیں۔
مواد کے لیے خطوط اور درخواستیں ڈاکٹر مارٹن سکار یا پروفیسر اینڈریو گوڈکن کو بھیجی جائیں۔یہ مضمون اصل ڈیٹا فراہم کرتا ہے۔
شماریاتی ماڈل بنانے کے لیے استعمال ہونے والا R کوڈ عوامی طور پر درخواست کے بغیر دستیاب ہے۔دوبارہ پرنٹ کی معلومات اور لائسنس www.nature.com/reprints پر مل سکتے ہیں۔
منرو، اے پی ایس وغیرہ۔برطانیہ میں ChAdOx1 nCov-19 یا BNT162b2 (COV-BOOST) کی دو خوراکوں کے بعد تیسری خوراک (بوسٹر) کے طور پر سات COVID-19 ویکسینز کی حفاظت اور مدافعتی: ایک مرحلہ 2، بلائنڈ، ملٹی سینٹر، بے ترتیب، کنٹرول شدہ ٹرائل۔لینسیٹ 398، 2258–2276 (2021)۔
سٹیورٹ، ASV et al.برطانیہ میں mRNA، وائرل ویکٹرز، اور پروٹین سے منسلک ویکسین کا استعمال کرتے ہوئے COVID-19 (Com-COV2) کے خلاف ہیٹرولوگس پرائمری ویکسینیشن کی امیونوجنیسیٹی، حفاظت، اور رد عمل: ایک مرحلہ 2، سنگل بلائنڈ، بے ترتیب آزمائش، غیر کمتری کا ٹیسٹ۔لینسیٹ 399، 36–49 (2022)۔
لی، اے آر آئی بی وغیرہ۔امیونوکمپرومائزڈ مریضوں میں COVID-19 ویکسینز کی افادیت: ایک منظم جائزہ اور میٹا تجزیہ۔BMJ 376, e068632 (2022)۔
Dejnirattisai, W. et al.امیونائزیشن کے بعد سیرم کے ذریعے SARS-CoV-2 مائیکرون ویرینٹ B.1.1.529 کی غیر جانبداری میں کمی۔لینسیٹ 399، 234–236 (2022)۔
Lipsich M, Krammer F, Regev-Yohai G, Lustig Y, اور Baliser RD بریک تھرو انفیکشن SARS-CoV-2 کے ٹیکے لگائے گئے افراد میں: پیمائش، وجوہات اور نتائج۔امیونولوجی کے قومی پجاری۔https://doi.org/10.1038/s41577-021-00662-4 (2021)۔
لیون، ای جی وغیرہ۔6 ماہ کے لیے BNT162b2 CoVID-19 ویکسین کے لیے کمزور مدافعتی مزاحیہ ردعمل۔N. eng.J. میڈیسن۔385، e84 (2021)۔
Carreño، JM et al.SARS-CoV-2 Omicron کے خلاف صحت یابی اور ویکسین سیرا کی سرگرمی۔فطرت 602، 682–688 (2022)۔
Chemaitelly، H. et al.SARS-CoV-2 Omicron BA.1 اور BA.2 ذیلی اقسام کے خلاف قطری mRNA ویکسین کے تحفظ کا دورانیہ۔medrxiv https://doi.org/10.1101/2022.03.13.22272308 (2022)۔
تائی، ایم زیڈ وغیرہ۔CoVID-19 ڈیلٹا ویکسین کے کامیاب انفیکشن کے ساتھ میموری بی سیل فریکوئنسی کم ہوتی ہے۔مالیکیولر میڈیسن EMBO۔14، e15227 (2022)۔
کنڈو، آر وغیرہ۔کراس ری ایکٹیو میموری ٹی سیلز COVID-19 رابطوں کو SARS-CoV-2 انفیکشن سے بچانے سے وابستہ ہیں۔قومی کمیون.13، 80 (2022)۔
Geurtsvan Kessel, CH et al.مخصوص SARS CoV-2 omicron-reactive T cell اور B cell ردعمل COVID-19 ویکسین وصول کنندگان میں۔سائنس.امیونولوجی۔https://doi.org/10.1126/sciimmunol.abo2202 (2022)۔
گاو، یو وغیرہ۔وراثت میں ملنے والے SARS-CoV-2 کے مخصوص T خلیے Omicron کی مختلف حالتوں کو پہچانتے ہیں۔قومی دوائی۔28، 472–476 (2022)۔
Scarr، MJ et al.پورے خون سے SARS-CoV-2-مخصوص T خلیات کی پیمائش صحت مند افراد اور ٹھوس اعضاء کے کینسر والے مریضوں میں غیر علامتی انفیکشن اور ویکسین کی مدافعتی صلاحیت کو ظاہر کرتی ہے https://doi.org/10.1111/imm.13433 (2021)۔
ٹین، اے ٹی وغیرہ۔ویکسین شدہ اور قدرتی طور پر متاثرہ افراد کے پورے خون میں SARS-CoV-2 سپائیک ٹی سیلز کی تیزی سے پیمائش۔J. کلینیکلسرمایہ کاریhttps://doi.org/10.1172/JCI152379 (2021)۔
Tallantyre, EU et al.ایک سے زیادہ سکلیروسیس کے مریضوں میں COVID-19 ویکسین کا ردعمل۔انسٹال کریںنیوران.91، 89–100 (2022)۔
بریڈلی RE et al.Wiskott-Aldrich سنڈروم کے ساتھ مسلسل COVID-19 انفیکشن علاج کی ویکسینیشن کے بعد غائب ہو گیا: ایک کیس رپورٹ۔J. کلینیکلامیونولوجی۔42، 32–35 (2022)۔